FISH用荧光显微镜的应用一

随着科学的发展的FISH技术也越来越成熟，从建立了非放射性原位杂交技术到如今的多色荧光原位杂交（M-FISH）、 DNA纤维荧光原位杂交技术（DNA fiber-FISH）荧光免疫核型分析和间期细胞遗传学(FICTION)。FISH技术和FISH用荧光显微镜被越来越多人了解，认识和用到。

下面由显微镜厂家——天津微仪光学来给您介绍下FISH用荧光显微镜的应用。

一、FISH用荧光显微镜应用于染色体结构变异与非整倍体的检测

（1）操作简便，立体分辨率高，观察分析方便，信号明亮清晰以及安全风险小；

（2）检测速度及探针稳定性比放射性标记探针好，探针标记后稳定，一次标记后可使用二年；

（3）方法敏感，能迅速得到结果；

（4）在同一标本上，利用不同颜色的荧光集团标记探针可同时检测几种不同的探针；

（5）不仅可用于分裂期细胞染色体数量或结构变化的研究，而且还可用于间期细胞的染色体数量及基因改变的研究；

（6）标记探针和荧光素试剂均可购置，使得FISH程序直接而可靠；

（7）某种特别种类的完整基因组、整个染色体、染色体亚区域或单拷贝序列依所用探针的复杂性可特异地分别开来；

（8）重复序列的杂交可被未标记基因组的DNA同探针预杂交而抑制，这对定位在大植入探针中的独特序列是决定性的。

二、FISH用荧光显微镜应用于基因扩增和缺失的检测

FISH空间分辨率和敏感性使得亲本和扩增基因在抗病虫害细胞中定位成为可能。被扩增基因主要在同一染色体臂上，但离初始亲本基因 有一定距离，且经常独立地位于染色体端粒部位;FISH分析表明细胞断裂可能是由于染色体含有扩增区域的结构重排。同时用FISH 可定 位转基因植物中外源基因位置和拷贝数，此法在番茄、烟草、大麦、小麦、黑麦等作物中已获成功。利用FISH技术也可检测一些与遗传 性疾病相关的基因缺失，如成功检测了aniridia疾病患者的缺失基因。

三、FISH用荧光显微镜应用于基因定位

荧光原位杂交技术可以直接测定DNA序列在染色体上的定位情况，基因的染色体定位是FISH在分子生物学上应用的重要方面。荧光原位杂交（FISH）技术还为当前着丝粒结构研究提供了重要的研究手段，主要是对着丝粒重复序列的分析，包括重复元件，如α、β和传统卫星DNA的性质和分布。FISH可以直接观察染色体端粒，简化了对其在核内的结构和功能研究，定位其端粒序列。

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