激光共聚焦显微镜对于样品尺寸确实有一定的特殊要求,这些要求主要基于显微镜的工作原理、样品台的尺寸以及显微镜的分辨率等因素。以下是对激光共聚焦显微镜样品尺寸要求的详细归纳:
一、生物样品尺寸要求
盖玻片厚度:对于生物样品,通常需要使用盖玻片进行封片。盖玻片的厚度要求通常不超过0.17mm,以确保显微镜能够准确聚焦并获取清晰的图像。
样品尺寸与形状:
样品需要能够贴壁良好,不能悬浮起来。这要求样品在载玻片上固定好后,其尺寸和形状应适合显微镜的观察。
对于需要重构的样品,需要明确扫描区域的大小、位置和Z步进。这些参数会影响测试时间,并且需要确保样品尺寸在显微镜的可观察范围内。
二、材料样品尺寸要求
*大面积:对于材料样品,其*大面积通常在1.11×1.8mm到5×5mm的范围内。这个范围是基于显微镜的视野和分辨率来确定的,以确保能够获取到清晰的图像。
样品平整性:材料样品B须平整,以确保显微镜能够准确聚焦并避免图像失真。
三、其他特殊样品尺寸要求
菌液/污泥/污水类样品:这类样品通常需要进行离心处理,以获得适当大小的沉淀物进行观察。沉淀物的尺寸应适合显微镜的观察范围。
生物膜样品:对于块体类生物膜样品,建议其长宽高尺寸不超过1cm;对于薄膜类样品,直径尺寸不超过2cm。同时,样品表面需要平整,并标出拍摄面。
植物类样品:植物类样品可以进行简单冰切及刀切处理。对于特殊类样品,如病理组织切片,可能需要按照特定的尺寸和要求进行制备。
与细胞共培养的样品:这类样品的尺寸要求取决于与细胞的作用方式和样本处理方式。例如,对于块体类样品,如果与细胞直接接触,则至少需要一个/种细胞/时间点;如果采用浸提方式处理,则需要根据浸提方式和检测时间点来确定样品量。
四、综合要求
拍摄需求:在提供样品时,需要明确激发/发射波长、拍摄类型(2D/3D)、拍摄倍数等要求,以便显微镜操作人员能够正确设置参数并获取满意的图像。
样品重量与尺寸限制:对于固体类直接拍摄样品,建议其长宽不超过20mm,厚度不超过10mm,重量不超过10g。同时,需要标出测试面以确保正确观察。
综上所述,激光共聚焦显微镜对于样品尺寸有一定的特殊要求。这些要求基于显微镜的工作原理和性能参数来确定,以确保能够获取到清晰、准确的显微图像。在准备样品时,需要根据具体的显微镜型号和检测需求来遵循这些要求。