共聚焦显微镜的应用介绍

共聚焦显微镜的应用介绍

ECM模拟凝胶的成像

细胞外基质 (ECM) 或属于所有细胞的非细胞成分，在细胞功能中是必不可少的。ECM 的弹性调节细胞的许多生物学功能，例如间充质干细胞的分化、粘附和迁移。

细胞生物学中常常通过水凝胶来模拟ECM。共聚焦显微镜的应用主要在于可与聚丙烯酰胺凝胶的压痕法结合使用。共聚焦自动图像成像可以有效测量 ECM 模拟中的压痕和穿孔。比如，共聚焦激光显微镜可以测量出 PAAM 凝胶组合物的深度和刚度。这种方法可以替代 AFM 纳米压痕法和微针法。

由于共焦成像可以可靠地探测大多数样品表面下方 0-200 m 之间的任何位置。然而，重要的是要注意，每个样本都有自己指定的深度，在该深度处散射、光漂白和噪声太高。据说有些标本应该完全避免使用共聚焦显微镜。

替代双光子显微镜功能

双光子显微镜或多光子显微镜产生两个光子来完成一个光子的工作。当获取两个光子，每个光子具有一半的能量，快速连续退出时，这个过程将取决于撞击样品的光强度的平方。

以大约 100 MHz 脉冲的红外激光器将使失焦光比聚焦光暗得多。

双光子显微镜的散射光不会激发荧光，因为它使用的红外波比高强度激光散射的少。这将较大程度地减少信号损失并可以穿透大约 1 mm 的组织，超过共聚焦显微镜穿透 200 μm 组织的能力。较低能量的红外光对细胞造成的损害也会降低。

根据电子显微镜的成像规则，我们可以知道共聚焦显微镜的分辨率远高于双光子显微镜。虽然，共焦显微镜比传统的荧光显微镜要强大得多，但双光子显微镜和透射电子显微镜的市场应用更为普遍。