激光共聚焦显微镜在细胞观察上的应用介绍

光学显微镜和扫描电子显微镜常用于金属材料的研究和开发。光学显微镜是一种二维形态工具，有效分辨率低，景深小，不能纵向观察三维形状。扫描电子显微镜样品制备复杂，有时会造成样品损伤，限制扫描面积和材料表面高度，无法测量面积、体积和深度等信息。利用激光共聚焦显微镜进行相应的检测，不仅可以获得与扫描电镜相当的显微图像，而且可以进行快速无损的测量。此外，其低引进和维护成本更符合当前行业成本控制的需要。

激光共聚焦显微镜利用激光束扫描样品焦面的每个点，通过照明针孔形成点光源，并将样品上的照射点成像在探针针孔上，可以实时动态观察和检测活细胞的结构、分子和离子。客户可根据需要配置各种放大倍率的物镜，自动镜头转台可以随镜头轻松更换，不需要再次对焦，非常方便。基于“大焦量反射光”共聚焦原理的显微镜测量精度受到读取反射光峰值能力的影响。在光接收机前面设计了针孔共焦模式。针孔的直径只有几十米，其作用是在不聚焦的情况下切断反射光。

激光共聚焦显微镜在细胞观察上的应用：

1、组织细胞荧光定量分析法

显示荧光在形态和结构上的位置，常用于原位分子杂交、肿瘤细胞凋亡观察、DNA损伤、单细胞水平修复等定量分析。

2、细胞间通讯的研究及物理化学成分

3、细胞内钙和 ph 的动态分析

利用荧光探针，激光共聚焦显微镜可以提高测量单个细胞内 pH 和多种功能离子在活细胞内的浓度及变化。